Pada tahun 1853, pasukan Rusia di bawah komando Jenderal Perovsky, setelah berjalan sejauh 900 batu melintasi kawasan tanpa air, menyerbu kubu Kokand Ak-Mechet, yang meliputi semua rute ke Asia Tengah. Tiga ratus Ural dan dua ratus Orenburg Cossack mengambil bahagian dalam kempen tersebut. Kubu ini diubah namanya menjadi Benteng Perovsky dan pembinaan garis Syr-Darya bermula, yang sepatutnya meliputi wilayah dari Laut Aral ke Ural Bawah dari serangan. Pada tahun 1856, pembinaan kubu bermula dari Benteng Perovsky ke Benteng Verny, untuk meliputi 900 lorong stepa dan menghubungkan garis Syr-Darya dan Siberia, untuk menjalin komunikasi antara pasukan Siberia, Ural dan Orenburg, yang kini telah untuk melindungi kawasan seluas 3,500 versts. Pada tahun 1860 pasukan Kokand berusaha untuk menangkap Verny, tetapi Siberian dan Semirechye Cossack menangkis serangan ini. Pada tahun 1864 tentera Rusia menduduki Chimkent dan mengalahkan orang Kokand. Orang-orang Kokand mengumpulkan seluruh kekuatan mereka dan melakukan serangan ke atas pasukan Rusia di kubu Turkestan, tetapi dalam perjalanan mereka menemui seratus Cossack Ural, Esaul Serov. Dalam pertempuran tiga hari di Ikan, Cossack mengalahkan serangan seluruh pasukan Kokand. Dari 110 Cossack, 11 terselamat, 47 cedera, 52 terbunuh.
Pada tahun 1865, tentera Rusia, bersama-sama dengan Ural Cossack, menduduki Tashkent. Wilayah Turkestan ditubuhkan. Pada tahun 1866 permusuhan bermula terhadap emir Bukhara yang menuntut Tashkent. Serangan Bukharian ditangkis. Pada tahun 1868, pasukan Jenderal Kaufman Rusia, yang termasuk Ural Cossack, pergi ke Samarkand, dan Emir Bukhara menyerah, mengakui protektorat Rusia.
Orenburg Cossack semasa penaklukan Turkestan
Pada tahun 1869 tentera Rusia dari Transcaucasia mendarat di pantai timur Laut Kaspia. Pada tahun 1873 sebuah kempen diatur menentang Khiva, pusat perdagangan hamba terbesar di Asia Tengah. Melalui padang pasir tanpa air, pasukan mendekati Khiva dari tiga sisi - dari Turkestan, dari garis Orenburg dan dari pantai Caspian. Ciberack Siberia dan Semirechye, 5 ratus Ural, 12 ratus penduduk Orenburg, resimen Kizlyar-Grebensky dan Sunzha-Vladikavkaz dari Terek dan bahkan sebahagian daripada rejimen Yeisk tentera Kuban turut serta dalam kempen tersebut. Semasa kempen, alam itu sendiri dikalahkan. Kemudian Khiva dibawa ribut pada 28 dan 29 Mei. Pada tahun 1875 Cossack Orenburg, Ural, Siberia dan Semirechye membantu tentera Rusia untuk menawan Kokand.
Turkestan dan wilayah Trans-Caspian, di mana kekuatan Rusia menyatukan, dibagi oleh padang rumput Turkmen, yang penduduk nomadennya terus menyerang. Sebelum oasis, di mana kubu kuat Turkmens - Geok-Tepe, berdiri, ada padang pasir untuk 500 versts. Pada tahun 1877 dan 1879. Pasukan Rusia dua kali tidak berjaya mencuba menduduki kubu ini. Pada tahun 1880 Jeneral Skobelev memulakan kempen menentang Geok-Tepe dari pantai Caspian. Bersama dia adalah rejimen Labinsky 1, Poltava 1 dan Taman 1 tentera Kuban Cossack. Detasmen Jenderal Kuropatkin, yang merangkumi Orenburg dan Ural Cossack, bergerak menuju Skobelev dari Turkestan. Detasmen bertemu di Geok-Tepe. Pengepungan kubu bermula pada 23 Disember 1880, dan pada 12 Januari 1881, ia dilanda ribut. Untuk pertempuran ini, rejimen Taman 1 Kuban dianugerahkan panji St. George. Oleh itu, seluruh Asia Tengah dianeksasi ke Rusia.
